碱性蛋白酶酶活力检测方法
酶活力是指酶催化某些化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下它所催化的某一化学反应的速度来表示。测定酶活力实际就是测定被酶所催化的化学反应的速度。酶促反应的速度可以用单位时间内反应底物的减少量或产物的增加量来表示,为了灵敏起见,通常是测定单位时间内产物的生成量。由于酶促反应速度可随时间的推移而逐渐降低其增加值,所以,为了正确测得酶活力,就必须测定酶促反应的初速度。
单的蛋白质和蛋白酶一般不反应。
适宜条件下,有水存在时,蛋白酶能够催化蛋白质的水解,即蛋白质和水反应生成氨基酸,而蛋白酶在反应前后总体保持不变。
木瓜蛋白酶是番木瓜未成熟乳汁中富含的一种巯基蛋白酶,是一种低特蛋白水解酶,可水解和赖氨酸的羧基端,同时木瓜蛋白酶中还含有一定的溶菌酶和纤维素酶,因此也兼具溶菌和纤维素水解活性。与菠萝蛋白酶相似,木瓜蛋白酶相比于动物源性中性蛋白酶,其活性条件范围更为宽泛,同时水解底物专一性较低,能够很好的动物源性消化酶对难消化吸收的食物成分进行精细化的消化吸收。
(蛋白酶K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,其相对分子量约为29.3 kDa,可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,应用广泛,可用于制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验,变性剂如SDS(1%)可提高其活性,常用工作浓度为50-100µg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。
碱性蛋白酶是目前市场**行的洗涤添加剂,能大幅度提高洗涤去污能力,特别对血渍、汗渍、奶渍、油渍等蛋白类污垢,具有特的洗涤效果。碱性蛋白酶在技术上采用原生质体诱变处理方法,从国内碱性蛋白菌生产菌2709枯草杆菌中研究选育出若干稳定高性能菌株,在后处理上,采用去渣盐析沉淀法,减少了蛋白酶的杂质含量和产品特有的气味,提高了溶解速度,与洗涤剂有更好的配伍性,延长了保质期。
ClpP的保守特性和相当大的蛋白水解活性使其成为双功能抗生素蛋白降解剂的理想起点,具有降解革兰氏阳性和革兰氏阴原体的多种必需细胞质蛋白的能力。相比之下,Lon和FtsH已被确定为较弱的蛋白水解机器,因此利用这些蛋白酶可能不是实现功能性、结构化POI的有效降解的选择。HtrA蛋白酶的周质位置及其作为不依赖ATP的蛋白酶的特身份使其成为另一个选择。近发现的用于ClpP和HtrA的新型蛋白酶激活剂为将这些蛋白酶与已知配体结合提供了一个理想的起点
碱性果胶酶能有效分解去除果胶质及其它共生物杂质,是一种比较理想的生物精练和煮练酶,被广泛应用于棉及其交织或混纺纤维、纱线和织物的各种前处理工序,还可用于麻类脱胶。
酶活定义
在50℃,pH9条件下,1分钟使聚半乳糖醛酸裂解产生1μ的不饱和聚半乳糖醛酸的酶量。
酶活构成
碱性果胶酶(主要包括原果胶酶,裂解酶和果胶水解酶)
酶活力
碱性果胶酶(固体)>7000U/g